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沙门氏菌及其检测方法

2014-11-8    来源:食品论坛    作者:佚名

一、       沙门氏菌
    沙门氏菌(学名:Salmonella),属肠杆菌科,是一种革兰氏阴性菌。已发现近千种(或菌株)。按其抗原成分,可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。其中与人体疾病有关的主要有甲组的甲型副伤寒杆菌,乙组的乙型副伤寒杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组的丙型副伤寒杆菌和猪霍乱杆菌,丁组的伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌和乙型副伤寒杆菌引起人类的疾病外,大多数仅能引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病,但有时也可污染人类的食物而引起食物中毒。
    感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品,可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。中国内陆地区也以沙门氏菌为首位。
    沙门氏菌中毒的症状主要由急性肠胃炎为主,潜伏期一般为四至四十八小时,短期是数小时,长期是两天至三天,前期症状有恶心、头疼,全身乏力和发冷等,主要症状有呕吐、腹泻、腹疼,粪便以黄绿色水样便,有时带脓血和黏液,一般发热的温度在三十八摄氏度至四十摄氏度,重病人出现打寒战、惊厥、抽搐和昏迷的症状。病程为三天至七天,一般预后良好,但是老人、儿童和体弱者如不及时进行急救处理也可导致死亡,多数沙门氏菌病患者不需服药即可自愈,婴儿、老人及那些已患有某些疾病的患者应就医治疗,沙门氏菌携带者不可从事准备食物的工作,直到获得医生的许可。
二、       沙门氏菌检测方法
1.     细菌培养法
      沙门氏菌为需氧及兼性厌氧菌。在普通琼脂培养基上生长良好,培养24h后,形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落,其菌落特征亦与大肠杆菌相似(无粪臭味)。1) 鉴别培养基(麦康凯、SS、伊红美蓝):一般无色菌落。2) 三糖铁琼脂斜面:斜面为红色,底部变黑并产气。
2.    生化鉴定
     沙门氏菌生化反应很活跃,能分解多种糖类和醇。1)发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露醇和山梨醇产气;2)不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇;3)不产吲哚、V-P反应阴性;4)不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气,大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖;除鸡白痢沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和仙台沙门氏菌等外,均能利用枸橼酸盐。3.    血清凝集法沙门氏菌的抗原分为菌体抗原(O)、鞭毛抗原(H)、荚膜抗原(K、Vi)三种。菌体抗原(O)─分群;鞭毛抗原(H)─分型;毒力抗原(Vi)─微荚膜成分。
1) O抗原  
      细胞壁表面的耐热多糖抗原;
      根据O抗原分为:A、B、C1-C4、D1-D3、E1-E4、F、G1-G2、H……Z和O51-O63以及O65-O67计51个O群,包括58种O抗原。  
2) H抗原
       蛋白质性鞭毛抗原,计有63种;
       同一O群沙门氏菌根据H抗原的不同可分成不同的血清型。
3) Vi抗原
       为微荚膜成分;相当于K抗原,与毒力(virulence)有关,故称为Vi抗原;
       其抗原性弱,刺激机体产生短暂低效价抗体, 伴随活菌一起存在.测定Vi抗体有助于检出带菌者;  
       新分离的菌株多有Vi抗原,但在普通培养基上多次传代后易丢失此抗原,这种变异称为“V-W变异”。
4) 血清型
      以O:H:Vi形式表示 ;   
     目前本菌属至少已有2300个血清型。对人和温血动物致病的血清型绝大多数分属于A—F群;在疾病中经常出现的不足50种。关于血清凝集法检测,推荐天津生物芯片公司生产的沙门氏菌诊断血清.

4.     核酸扩增法
      核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。

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